Virus Febre Amarela, Detecção do RNA por PCR, Vários Materiais

Orientações necessárias

• Não é necessário preparo para este exame.

Orientações necessárias

• Não é necessário preparo para este exame.

Processamento e adequação da amostra

1) SANGUE

• Centrifugar o material por 10 minutos a 2200g a 18 °C, no máximo 8 horas depois da coleta.
• Transferir todo o plasma, com pipeta estéril e evitando tocar a camada de leucócitos, para um tubo plástico de 4 mL estéril.
• Em casos de coleta difícil, o volume mínimo a ser enviado é de 1 mL de plasma.
• Enviar congelado à seção.
• Estabilidade da amostra:

-- Temperatura ambiente: não aceitável;

-- Refrigerada (2-8 ºC): 8 horas;

-- Congelada (-20 ºC): 30 dias

2) LIQUOR

• Enviar no mínimo 1 mL de liquor (ideal 2 mL) em tubo estéril.
• Refrigerar a amostra a 2-8ºC.
• Estabilidade da amostra:

-- temperatura ambiente: não aceitável;

-- refrigerada: 48 horas;

-- congelada: 30 dias

Método

• Reação de polimerase em cadeia (PCR) em tempo real.

Valor de referência

Indetectável

Interpretação e comentários

O teste é utilizado para o diagnóstico de febre amarela, doença grave, de alta letalidade, causada pelo vírus da febre amarela. A doença é endêmica no Brasil, mas se comporta com ondas epidêmicas periódicas. O exame é importante ainda para diagnóstico diferencial das

várias arboviroses que circulam concomitantemente no Brasil atualmente: dengue, zika, chikungunya, febre amarela, mayaro, oropouche e vírus do Nilo Ocidental. Em pacientes com febre amarela, a viremia pode ser detectada por 5 a 10 dias após o início dos sintomas, enquanto a produção de anticorpos se inicia a partir do quinto dia. Na primeira semana de doença, portanto, o teste recomendado para o diagnóstico é a PCR, enquanto a pesquisa de anticorpos é útil a partir da segunda semana. Este teste detecta uma região conservada do RNA do vírus da febre amarela, logo, não é capaz de distinguir o vírus selvagem do vacinal. Desse modo, pessoas vacinadas contra febre amarela até 30 dias antes da coleta da amostra podem apresentar resultado detectável (positivo).